收集药理学+分子对接，开采双疾病药食同源药物，并推行理会了机制！

题目：抗懆急和抗抑郁药物-食物雷同物的收集药理学筛选、体外和体内评估

英文名：Network pharmacology screening, in vitro and in vivo evaluation of antianxiety and antidepressant drug-food analogue

杂志：Phytomedicine

影响因子：6.7/Q1

发表时期：2024年9月

商议布景：抑郁症和懆急症是常见的精神疾病，而当今使用的化学药物频繁会产生严重的不良响应。中国领有丰富的药食两用中草药，以其安全有用而著称。本商议旨在欺诈收集药理学等工夫，从药用和食用草本植物中开采出具有更好抗抑郁和抗懆急成果的新式制剂，并在体外和体内推行中考证其成果。

商议念念路：欺诈收集药理学和分子对接，详情具有抗懆急和抗抑郁后劲的药材。进一步筛选出具有细胞保护作用和无毒特质的草药，配制成草药混杂物。随后，建造PC12细胞毁伤模子和小鼠慢性不能瞻望轻度应激（CUMS）模子，以评估配方的成果。规矩初步筛选了十种药材，其中六种相宜配制混杂物，即甘草、大枣、钩藤、桑叶、黄芪和金银花（GDGSHJ）。GDGSHJ配方可减少乳酸脱氢酶（LDH）的渗漏，减少细胞凋一火，并在CUMS小鼠模子中娇傲出精湛的抗抑郁和抗懆急作用。此外，GDGSHJ还能上调血清中5-羟色胺（5-HT）的含量和脑组织中5-HT、γ-氨基丁酸（GABA）和多巴胺（DA）的水平。它还下调了小鼠海马中SLC6A4和SLC6A3基因的抒发，同期上调了HTR1A、DRD1、DRD2和GABRA1基因的抒发。该制剂具有巨大的抗抑郁和抗懆急作用，且不会产生严重毒性，这种功效似乎是由小鼠海马内关联基因的抒发介导的，通过均衡血清中的5-HT水顺心脑组织中的DA、GABA和5-HT水平来达到这一成果。

图1

商议规矩：

1、收集药理学分析规矩

通过数据库搜索共详情了103个交叉靶标（图2A），构建了一个PPI收集（图2B）。其中，度值在22或以上的49个节点被认定为本商议的中枢靶点。随青年景了"懆急和抑郁靶点-活性因素-同源草药"收集（图2C）。在49个靶标中，有26个不错与120种活性因素负匹配，荒谬于来自吞并起首的79种草药。接收平直拓扑分析谋划中药材节点过甚相应活性因素的度值之和，详情边际的数目。及第边值最大的前10种药材，包括甘草、桑叶等，进行进一步商议（图2D）。

图2

从子收辘集索要的十种中枢药材被用于构建"中枢药材-有用因素-抑郁和懆急靶点"收集（图3A）。阐明富集基因的数目，前十名规矩以柱状图娇傲（图3B）。这些靶标主要与G卵白偶联受体信号通路和化学突触传递等生物经由相关。在细胞构成方面，它们与细胞质膜构成等方面相关。分子功能则与卵白质沟通、G卵白偶联受体活性等相关。KEGG富集分析共发现了9条通路，包括神经活性配体-受体相互作用和钙信号通路（图3C）。

图3

2、分子对接规矩

在"中枢药用植物-活性因素-抑郁和懆急靶标"收辘集，以25个靶标算作受体卵白，以主要的7种中枢因素算作配体，进行了175次分子对接。一般来说，较小的沟通能标明配体与受体之间的沟通活性更强。在25个抑郁和懆急靶点中，大大宗皆阐扬出与要道活性因素的精湛沟通活性（图4A）。其中，β-谷甾醇与HTR2C的沟通活性最高，沟通能为-10.7 kcal/mol，其次是豆甾醇与DRD2和好意思迪卡品与SLC6A4。三维图形娇傲了与遐想沟通活性最好的活性因素的对接方式（图4B）。

图4

3、GDGSHJ制剂对皮质酮贬责的PC12细胞的保护作用

将400μM浓度的皮质酮线路于PC12细胞24小时后，PC12细胞的增殖率着落了50.80±3.69%，标明细胞受到了严重封闭（图5）。在商议10草药对皮质酮教学的PC12细胞升值率的影响（图6）。100mg/L甘草骚扰后的PC12细胞活性为63.93±7.6%。值得留心的是，400mg/L大灶、勾七子、桑烨、黄骐和金银化的骚扰导致PC12细胞活性分歧为72.38±7.04%、65.23±2.48%、72.11±4.63%、75.51±4.67%和75.46±1.73%。相背，独中世（200和400mg/L）、高梁江（200和400mg/L）和百果（400mg/L）对皮质酮教学的PC12细胞阐扬出毒性作用。白编豆在0-400mg/L浓度范围内，对皮质酮贬责的PC12细胞无显耀影响。在50、100、200和400mg/L的浓度下，GDGSHJ制剂有用逆转细胞毁伤，缩小LDH活性，改善皮质酮教学的PC12细胞膜毁伤，并以剂量依赖性样式羁系皮质酮教学的细胞凋一火（图7）。

图5

图6

图7

4、GDGSHJ制剂缓解小鼠的懆急抑郁样行径

模子制作完成后，模子组小鼠的体重增多昭彰低于平常组，同期还出现了毛发凌乱。这些症状在中剂量GDGSHJ和文拉法辛组昭彰逆转。在糖水偏好推行中，模子组小鼠的糖水偏好率（42.04±7.72%）昭彰低于空缺组（84.59±4.36%）。清明地推行标明，与空缺组（25064±4539mm，29.03±12.05s）比较，模子组小鼠在中心区的总行进距离和停留时期（11830±6011mm，6.31±3.57s）均有所减少。EPM规矩娇傲，模子组的懆急指数（86.80±6.44%）高于平常组（52.39±8.26%）。与平常对照组（82.6±10.57s，66.9±10.49s）比较，模子组的FST和TST娇傲固定时期蔓延（135.6±10.76s，115.4±9.43s），标明建模获胜。GDGSHJ中剂量组和高剂量组昭彰逆转了这些情况，标明其具有很强的抗抑郁活性（图8）。

图8

5、GDGSHJ制剂可增多小鼠血清和脑组织中神经递质的水平

在小鼠神经递质水平方面，空缺组的血清中5-HT和NE水瓜分歧为185.75±11.83ng/mL和378.32±32.64pg/mL。CUMS刺激模子组的血清5-羟色胺（150.85±6.38ng/mL）和NE（294.84±20.01pg/mL）水平显耀着落。阳性对照药物文拉法辛昭彰普及了血清5-HT和NE的水平。同期，中、高剂量的GDGSHJ对血清5-HT水平有昭彰转移作用，但对NE水平无昭彰影响。固然有昭彰的趋势，但CUMS小鼠的血清GABA和DA与空缺对照组莫得昭彰相反（图9）。在脑组织中，空缺组的5-HT、NE、GABA和DA水瓜分歧为195.39±12.88ng/mL、372.03±36.08pg/mL、301.06±21.92pg/mL和301.06±21.92。pg/mL和168.45±12.70pg/mL。模子组在接受CUMS刺激后，5-HT（160.64±8.27ng/mL）、NE（301.26±32.57pg/mL）、GABA（228.34±7.53pg/mL）和DA(134.43±6.30pg/mL）昭彰着落。使用阳性药物文拉法辛可逆转这些效应，导致脑组织中的5-羟色胺、GABA和DA含量增多。一样，与CUMS组比较，中剂量和高剂量GDGSHJ均能显耀普及脑组织中5-羟色胺、GABA和DA的含量。然则，GDGSHJ对脑组织中NE的影响不昭彰（图10）。

图9

图10

6、GDGSHJ制剂影响CUMS小鼠海马部分瞻望靶基因的mRNA抒发

在CUMS刺激后，小鼠海马区SLC6A4和SLC6A3基因的mRNA抒发昭彰上调。相背，HTR1A、DRD1、DRD2和GABRA1基因的mRNA抒发则昭彰下调。相背，与模子组比较，给以中等剂量的GDGSHJ能显耀逆转这些规矩（图11）。

图11

追思：本文欺诈收集药理学的秩序推出双疾病靶点有作用的中药配方，况兼在体外作念的考证，念念路值得学习，著述中的分析秩序还不错更丰富，傲星生物有丰富的分析决策、完善的卑鄙考证、机制商议就业，一双一专属就业为您排纷解难，助您轻佻搪塞毕业和晋升！